用于紫外可見分光光度計(jì)的光度準(zhǔn)確度測(cè)試的材料，應(yīng)該是純度高、穩(wěn)定性好的物質(zhì)。這些物質(zhì)中最主要的是鉻酸鉀（K2 Cr04，一般在堿性溶液中）、重鉻酸鉀(K2 Cr2 07，一般在酸性溶液中)、硝酸鉀、中性濾光片等。在堿性溶液中的鉻酸鉀是一種好材料，但是因?yàn)楹袎A性，不能儲(chǔ)藏在普通玻璃容器中，而需要儲(chǔ)藏在石英器皿中。，硝酸鉀本身不大穩(wěn)定。這些，都限制了它們的使用。最好選擇易于純化、又溶于酸性介質(zhì)中的物質(zhì)，并且它們的稀溶液也是很穩(wěn)定的。因此，重鉻酸鉀的O．005mol/L H2 S04溶液經(jīng)常被使用。許多科學(xué)家認(rèn)為，用紫外濾光片來測(cè)試紫外可見分光光度計(jì)的光度準(zhǔn)確度，具有很大的優(yōu)點(diǎn)。因?yàn)樗鼈兊姆€(wěn)定性更好，又便于攜帶。
紫外可見分光光度計(jì)的光度準(zhǔn)確度測(cè)試方法，目前國內(nèi)外各生產(chǎn)廠家作法不-，其主要原因是各國的國家標(biāo)準(zhǔn)不同。如美國國家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定：“選擇合適的標(biāo)參比材料，在規(guī)定的波長(zhǎng)處，連續(xù)測(cè)10個(gè)吸光度或透射比讀數(shù)，取10個(gè)讀數(shù)的均值，實(shí)際吸光度或透射比與觀測(cè)值的平均值之差，即為光度準(zhǔn)確度”。美國國家乏標(biāo)準(zhǔn)還規(guī)定了計(jì)算光度準(zhǔn)確度的標(biāo)準(zhǔn)偏差“S”的方法.
美國國家標(biāo)準(zhǔn)局(NBS)規(guī)定，在可見區(qū)用930標(biāo)準(zhǔn)片來測(cè)定光度準(zhǔn)確度，其標(biāo)準(zhǔn)透射比值分別為10%、20%、30%的中性玻璃濾光片。規(guī)定還指出也可用NBS的931，它是一種溶液。而在紫外區(qū)內(nèi)，則規(guī)定用NBS的203來測(cè)定光度準(zhǔn)確度；它是一種標(biāo)準(zhǔn)透射比值分別為90%、30%、10%的熔融石英濾光片。此外，美國標(biāo)準(zhǔn)還規(guī)定在紫外區(qū)內(nèi)，用戶還可以自己配制高純度的化合物溶液來測(cè)定光度準(zhǔn)確度。為此，美國NBS已發(fā)布了鉻酸鉀(K2 Cr04)、重鉻酸鉀( K2 Cr2 04 )等標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)可供選用。
我國在1 992年制訂的紫外可見分光光度計(jì)國家標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定，用重鉻酸鉀溶液來測(cè)試紫外區(qū)的光度準(zhǔn)確度，并明確指出了測(cè)試波長(zhǎng)。在可見光區(qū)規(guī)定可用中性濾光片來檢測(cè)光度準(zhǔn)確度，其標(biāo)準(zhǔn)片的透射比值分別為1O%、20%、40%;同時(shí)還規(guī)定在紫外可見整個(gè)區(qū)間，都可用中性濾光片來檢測(cè)光度準(zhǔn)確度，其標(biāo)準(zhǔn)片的透射比值也分別為10%、20%、40%。
用安徽省計(jì)量測(cè)試研究所和國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心共同研制的紫外光區(qū)透射比標(biāo)準(zhǔn)濾光片，測(cè)試日本島津公司的UV-260和無錫高速分析儀器廠生產(chǎn)的WF2-753型紫外可見分光光度計(jì)的光度準(zhǔn)確度。該標(biāo)準(zhǔn)濾光片的TA優(yōu)于O．2%，穩(wěn)定性優(yōu)于O．1%，其測(cè)試波長(zhǎng)分別為270nm、293nm和350nm，相應(yīng)的透射比標(biāo)準(zhǔn)值各為11. 4%、3.9%、、52. 9%。具體操作時(shí)，以空氣作參照，對(duì)規(guī)定的波長(zhǎng)處各測(cè)7次，取其平均值，與標(biāo)準(zhǔn)值相減，則得到各規(guī)定的波長(zhǎng)處的TA。然后，取三個(gè)規(guī)定波長(zhǎng)中最差者作為被測(cè)紫外可見分光光度計(jì)儀器的透射比準(zhǔn)確度。再求得被測(cè)儀器在各規(guī)定的波長(zhǎng)處的透射比準(zhǔn)確度，然后以三個(gè)規(guī)定波長(zhǎng)中的最差者，作為被測(cè)儀器的透射比準(zhǔn)確度。該測(cè)試工作得到了令人滿意的結(jié)果。
還用鉻酸鉀、重鉻酸鉀溶液，分別在220nm、275nm、313nm和350nm等波長(zhǎng)處，對(duì)自己研制的微量紫外分光光度計(jì)的光度準(zhǔn)確度進(jìn)行了簿蘿，都得到了令人滿意的結(jié)果。
