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    分光光度計(jì)，又稱(chēng)光譜儀(spectrometer)，是將成分復(fù)雜的光，分解為光譜線的科學(xué)儀器。測(cè)量范圍一般包括波長(zhǎng)范圍為380~780 nm的可見(jiàn)光區(qū)和波長(zhǎng)范圍為200～380 nm的紫外光區(qū)。不同的光源都有其特有的發(fā)射光譜,因此可采用不同的發(fā)光體作為儀器的光源。鎢燈的發(fā)射光譜：鎢燈光源所發(fā)出的380～780nm波長(zhǎng)的光譜光通過(guò)三棱鏡折射后，可得到由紅、橙、黃、綠、藍(lán)、靛、紫組成的連續(xù)色譜；該色譜可作為可見(jiàn)光分光光度計(jì)的光源。
    分光光度計(jì)作為一種精密儀器，在運(yùn)行工作過(guò)程中由于工作環(huán)境，操作方法等種種原因，其技術(shù)狀況必然會(huì)發(fā)生某些變化，可能影響設(shè)備的性能，甚至誘發(fā)設(shè)備故障及事故。因此，分析工作者必須了解分光光度計(jì)的基本原理和使用說(shuō)明，并能及時(shí)發(fā)現(xiàn)和排除這些隱患，對(duì)已產(chǎn)生的故障及時(shí)維修才能保證儀器設(shè)備的正常運(yùn)行。
    1)若大幅度改變測(cè)試波長(zhǎng)，需稍等片刻，等燈熱平衡后，重新校正“0”和“100%”點(diǎn)。然后再測(cè)量。
    2)指針式儀器在未接通電源時(shí)，電表的指針必須位于零刻度上。若不是這種情況，需進(jìn)行機(jī)械調(diào)零。
    3)比色皿使用完畢后，請(qǐng)立即用蒸餾水沖洗干凈，并用干凈柔軟的紗布將水跡擦去，以防止表面光潔度被破壞，影響比色皿的透光率。
    4)操作人員不應(yīng)輕易動(dòng)燈泡及反光鏡燈，以免影響光效率。
    5)1900型等分光光度計(jì)，由于其光電接收裝置為光電倍增管，它本身的特點(diǎn)是放大倍數(shù)大，因而可以用于檢測(cè)微弱光電信號(hào)，而不能用來(lái)檢測(cè)強(qiáng)光。否則容易產(chǎn)生信號(hào)漂移，靈敏度下降。針對(duì)其上述特點(diǎn)，在維修、使用此類(lèi)儀器時(shí)應(yīng)注意不讓光電倍增管長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下，因此在預(yù)熱時(shí)，應(yīng)打開(kāi)比色皿蓋或使用擋光桿，避免長(zhǎng)時(shí)間照射使其性能漂移而導(dǎo)致工作不穩(wěn)。
    6)放大器靈敏度換擋后，必須重新調(diào)零。
    7)比色杯的配套性問(wèn)題。比色杯必須配套使用，否則將使測(cè)試結(jié)果失去意義。在進(jìn)行每次測(cè)試前均應(yīng)進(jìn)行比較。具體方法如下;分別向被測(cè)的兩只杯子里注入同樣的溶液，把儀器置于某一波長(zhǎng)處，石英比色杯;220nm、700nm裝蒸餾水，玻璃比色杯：700nm處裝蒸餾水，將某一個(gè)池的透射比值調(diào)至100%，測(cè)量其他各池的透射比值，記錄其示值之差及通光方向，如透射比之差在±0.5%的范圍內(nèi)則可以配套使用，若超出此范圍應(yīng)考慮其對(duì)測(cè)試結(jié)果的影響。
    分光光度計(jì)分操作中容易出現(xiàn)的幾個(gè)典型故障及其排除方法：
    1)儀器不能調(diào)零。可能原因：
    a)光門(mén)不能完全關(guān)閉。解決方法：修復(fù)光門(mén)部件，使其完全關(guān)閉。
    b)透過(guò)率“100%”旋到底了。解決方法：重新調(diào)整“100%”旋鈕。
    c)儀器嚴(yán)重受潮。解決方法：可打開(kāi)光電管暗盒，用電吹風(fēng)吹上一會(huì)兒使其干燥，并更換干燥劑。
    d)電路故障。解決方法：送修理部門(mén)，檢修電路。
    2)儀器不能調(diào)“100%”。可能原因：
    a)光能量不夠。解決方法：增加靈敏度倍率檔位，或更換光源燈(盡管燈還亮)。
    b)比色皿架未落位。解決方法：調(diào)整比色皿架使其落位。
    c)光電轉(zhuǎn)換部分老化。解決方法：更換部件。
    d)電路故障。解決方法：調(diào)修電路。
    3) 測(cè)量過(guò)程中,“100%”點(diǎn)經(jīng)常變動(dòng)。可能原因：
    a)比色皿在比色皿架中放置的位置不一致，或其表面有液滴。解決方法：用擦鏡紙擦干凈比色皿表面，然后將其安放在比色槽的左邊，上面用定位夾定位。
    b)電路故障(電壓、光電接收、放大電路)。解決方法：送修。
    4)數(shù)顯不穩(wěn)。可能原因：
    a)預(yù)熱時(shí)間不夠。解決方法：延長(zhǎng)預(yù)熱時(shí)間至30分鐘左右(部分儀器由于老化等原因，長(zhǎng)時(shí)間處于工作狀態(tài)時(shí)，也會(huì)工作不穩(wěn))。
    b)光電管內(nèi)的干燥劑失效，使微電流放大器受潮。解決方法：烘烤電路，并更換或烘烤干燥劑。
    c)環(huán)境振動(dòng)過(guò)大、光源附近空氣流速大、外界強(qiáng)光照射等。解決方法：改善工作環(huán)境。
    d)光電管、電路等其它原因。解決方法：送修。
    五、提高分光光度計(jì)透射比檢定及使用精度的幾種方法
    在分光光度計(jì)的使用或檢定中,透射比(吸光度)的準(zhǔn)確度是衡量?jī)x器工作性能的一項(xiàng)重要指標(biāo),它的準(zhǔn)確程度直接關(guān)系到所測(cè)數(shù)據(jù)的可信性及科學(xué)性。所以提高此項(xiàng)指標(biāo)的使用及檢定準(zhǔn)確度顯得尤為重要。