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科普知識
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分光光度計

可見分光光度計操作應用說明

發布日期:2022-10-09 點擊率:185

可見分光光度計,是用于檢測和跟蹤記錄被測物質對可見光的吸光度并進行定量分析的儀器設備。

工作原理

溶液中的物質在可見光的照射激發下,產生對光吸收的效應,這種吸收是具有選擇性的。各種不同的物質都有各自的吸收光譜,因此當某單色光通過溶液時,其能量就會被吸收而減弱,光能量減弱的程度和物質的濃度有一定的比例關系,即符合朗伯一比爾定律(見圖3-10)。

光吸收示意圖

液的光程長不變時,透過光是根據溶液的濃度而變化的,可見分光光度計的基本原理是根據上述物理光學現象而設計的。

儀器的結構

可見分光光度計的種類和型號甚多。實驗化學中常用的有72型和722型可見分光光度計,現分別簡要介紹如下。

1.72型分光光度計的結構

72型分光光度計是由磁飽和穩壓器、單色器和檢流計三大部分組成。使用時,應先把這三部分用導線按圖3-11接好。

將單色器與穩壓器的輸出接線柱5.5V或10V連接,再按照導電片上套管的顏色,把單色器與檢流計連接,紅色套管的導電片接在“十”號處,綠色套管的導電片接“一”號處,第三個導電片接地線。穩壓器和檢流計分別接220V電源。

分光光度計

2.722型光棚-分光光度計的結構

722型光柵分光光度計,采用自準式色散系統和單光束結構,色散元件為衍射光柵,使用波長為330~800nm數字顯示讀數還可以直接測定溶液的濃度。其外形如圖3-12所示。

分光光度計儀器外型

儀器的使用

1.72型分光光度計的使用方法

(1)接通電源前,應先使穩壓器、檢流計和單色器的電源開關均處“關”的位置。光量調節器逆時針轉至最小位置,單色器光閘門撥到黑點,然后把穩壓器和檢流計接上220V交流電源。

(2)將檢流計電源開關打開,分擋開關由“斷”撥至“直接”或“X1”檔,指示光點出現在標尺上,用零位調節器將光標線準確地調至透光度標尺的“0”點上。

(3)打開穩壓器和單色器的電源開關,把光閘門撥到“紅”點上,再沿順時針方向旋轉光亮調節器,使檢流計的指示光標線到達標尺上透光度100%處附近,預熱10min后,待光標穩定后再開始使用。(4)把波長調節器調節到需要的波長處。

(5)將單色器的光閘門撥到“黑”點處,再一次核對檢流計零位(即透光度為“0”處)。

(6)將盛空白溶液的比色皿放人比色皿架第一格中,其余=格放入待測溶液,蓋上暗箱蓋,將空白溶液推入光路(拉桿推到底)。把光閘門撥到“紅”點上,輕輕調節光量調節器,把光標線準確地調至透光度“100”的讀數上。

(7)把拉桿抽出一格,使有色溶液進入光路,光標線所指的A值就是該溶液的吸光度,再依次測定其他溶液。

(8)測定完畢,取出比色皿把溶液倒掉,用蒸餾水沖洗干凈,吸干,放回比色皿盒子內。全部旋鈕和開關恢復到使用前的狀態,切斷電源,把儀器罩好。

注意:

1)在接通電源之前,應檢查各個調節旋'題是否均在起始位置,然后再打開電源開關。儀器停止工作時,必須把開關放在“關”上再切斷電源。

2)只要空白溶液的透光度能調到“100”,單色器的電源電壓應用5.5V,不用10V。這主要是延長光源燈的壽命,降低單色器的溫度。

3)檢流計背面有兩個電源插孔,分別標有“220V”和“6V”。若用220V交流電源,則導線插頭應橋入“220V”孔內,者用6V直流電源,則導線插頭應插入“6V”孔內,不能插錯。否則將把儀器燒壞。

4)在儀器使用過程中,應注意保護光電池,選免長時·間照射而疲勞。當取換溶液和記錄讀數后.應及時將光聞門拔到“黑”點,切斷入射光。

5)應注意保護比色皿的透光面的光潔。使用時只能用手拿毛玻璃面,勿拿透光面。據拭整外溶液時只能用鏡頭紙。

6)比色皿盛放溶液不能超過其高度的4/5,以免溶液溢入機件內部。

2.722型光柵分光光度計使用方法

(1)在接通電源前,應對儀器的安全性進行檢査,電源線接線應牢固,接地線通地要良好,各個調節旋鈕的起始位置應該正確,然后再接通電源。

(2)將靈敏度派或調至“1”擋(放6倍率最小)。調波長調節器至所需波長。

(3)開啟電源開關,指示燈亮,選擇開關置于''T”,調節透光度''100%”旋鈕,使數字顯示100.0”左右,預熱20min。

(4)打開吸收地暗室蓋(光門自動關閉),調節“0”旋鈕,使數字顯示為“00.0”,蓋上吸收地蓋,將參比溶液置于光路,使光電管受光,調節透光度“100%”旋鈕,使數字顯示為“100.0”。

(5)如果顯示不到“100”,則可適當增加電流放大器靈敏度擋數,但應盡可能使用低擋數,這樣儀器將有更高的穩定性。當改變靈敏度后必須按重新校正“0”和“100”。

(6)按(4)連續幾次調整“00.0”和“100”后,將選擇開關置于“A”,調節吸光度調零旋鈕,使數字顯示為“.000”。然后將待測溶液推入光路,顯示值即為待測樣品的吸光度值A。

(7)濃度c的測量。選擇開關由“A”旋至“c”,將標準溶液推入光路,調節濃度旋鈕。使得數字顯示值為已知標準溶液濃度數值。將待測樣晶溶液推人光路,即可讀出待測樣品的濃度值。

(8)如果大幅度改變測試波長時,在調整“00.0”和“100”后稍等片刻(因光能量變化急劇,光電管受光后響應緩慢,需一段光響應平衡時間),當穩定后,重新調整“00·0”和“100”即可工作。

注意:

1)使用前,使用者應該首先了解本儀器的結構和原理,以及各個旋鈕之功能。

2)儀器接地要良好,否則顯示數字不穩定。

3)儀器左側下角有一只干操劑筒,應保持其干燥,發現干操劑變色應立即更新或烘干后再用。

4)當儀器停止工作時,切斷電源,電源開關同時切斷,并章好儀器。

以上為筆者對可見分光光度計的工作原理、結構外型及使用方法進行相關介紹,希望可以提供行業相關試用人員一些參考借鑒。

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